A：sgRNA與Cas9/dCas9構(gòu)建在同一個(gè)質(zhì)粒載體上，稱之為單載體系統(tǒng)；將這一個(gè)質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)到細(xì)胞中即可發(fā)揮基因編輯功能；

sgRNA與Cas9/dCas9分別構(gòu)建在兩個(gè)質(zhì)粒載體中，稱之為雙載體系統(tǒng)；這兩個(gè)載體共同轉(zhuǎn)入細(xì)胞中才能發(fā)揮功能。

目前構(gòu)建過的敲除、激活、抑制文庫既有單質(zhì)粒系統(tǒng)，也有多質(zhì)粒系統(tǒng)。

我司現(xiàn)有的敲除、激活載體單質(zhì)粒系統(tǒng)，雙質(zhì)粒系統(tǒng)都有；抑制載體是單質(zhì)粒系統(tǒng)。

A：不能,基因激活和抑制一般靶向啟動(dòng)子的不同區(qū)域，敲除文庫靶向CDS區(qū)。

A：濃度最好達(dá)到200ng/ul。

A：1.芯片設(shè)計(jì)2.芯片合成3.文庫構(gòu)建和質(zhì)粒制備4.NGS測(cè)序5.病毒包裝（選做）。按照這個(gè)步驟收費(fèi)的，需要先確認(rèn)是否需要我們?cè)O(shè)計(jì)?如果需要，告知物種和基因ID，如果不需要提供序列評(píng)估報(bào)價(jià)，文庫載體也確認(rèn)下。

可以用NNk的一個(gè)混合物，也可以用Trimer引物構(gòu)建基因文庫。

他設(shè)計(jì)是針對(duì)不同區(qū)域進(jìn)行的一個(gè)設(shè)計(jì)，但是設(shè)計(jì)的條數(shù)是一樣的。SgRNA序列是不一樣的。抑制文庫是單質(zhì)粒系統(tǒng)，激活文庫大部分都是雙質(zhì)粒系統(tǒng)。

要先確定客戶是多基因還是單基因，還要確定設(shè)計(jì)幾條。如果說按照芯片設(shè)計(jì)價(jià)格是3000，也可以按照條數(shù)收費(fèi)

Trimer引物合成的一個(gè)優(yōu)勢(shì)，，可以根據(jù)客戶的物種進(jìn)行一個(gè)設(shè)計(jì)。合成的方式效果也好，偏差更低。

一代測(cè)序，轉(zhuǎn)到細(xì)菌上進(jìn)行一個(gè)擴(kuò)大，挑選單克隆去看測(cè)序的結(jié)果是否是在我們?cè)O(shè)計(jì)的序列之內(nèi)。

至少是200-300條，客戶全基因組范圍比較大的話會(huì)設(shè)計(jì)更多。

三保一套餐是我們?yōu)榇_保基因敲除成功而提供的一種服務(wù)。我們承諾，通過提供三條sgRNA選擇，確保至少有一條sgRNA能夠成功敲除目標(biāo)基因，從而為客戶提供更大的成功率和保障。

我們采用的目的細(xì)胞是HepG2、Hela、293T細(xì)胞，如果有其他細(xì)胞要求，可以選擇定制化服務(wù)。